1、反应体系的配制以25 ul为例：（配比表见附图）
反应程序的设定以Bio-Rad CFX Real Time PCR仪为例：
基因表达量的检测-扩增曲线的生成，
95℃ 3min
95℃ 10s
60℃ 30s （此步骤末收集信号） 40 cycles。
引物特异性检测-熔解曲线的生成，
95℃ 10s
65℃ -95℃， 每半℃升一次温度，持续5s（此步骤末收集信号）。
1、反应体系的配制以25 ul为例：（配比表见附图）
反应程序的设定以Bio-Rad CFX Real Time PCR仪为例：
基因表达量的检测-扩增曲线的生成，
95℃ 3min
95℃ 10s
60℃ 30s （此步骤末收集信号） 40 cycles。
引物特异性检测-熔解曲线的生成，
95℃ 10s
65℃ -95℃， 每半℃升一次温度，持续5s（此步骤末收集信号）。